【关键词】 高效液相色谱法；薄层色谱；盐酸小檗碱；五灵止痛胶囊
五灵止痛胶囊由五灵脂、蒲黄、冰片三味药组成，是从五灵止痛片改剂型而来，原标准的检验项目不能满足质量控制的要求。故在胶囊剂中须增加含量测定项，本文建立了五灵止痛胶囊中冰片的含量测定方法，以保证产品质量。现报告如下。
1 仪器与材料
HP6890气相色谱仪; 检测器：FID; 柱：HP-Wax Bonded弹性石英毛细管柱(PEG-20M为固定液， 0.25mm×30m); 龙脑对照品(由中国药品生物制品检定所提供, 批号：110881-200202)供含量测定用; 试剂为分析纯。
样品及相关药材由吉林省镇莱银诺克药业有限公司提供。药材由长春市药品检验所中药室鉴定。阴性对照样品自制。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 检测器：FID; 色谱条件： HP-Wax Bonded弹性石英毛细管柱(PEG-20M为固定液，0.25mm×30m); 柱温：170℃; 进样口温度：250℃; 检测器温度：250℃;载气流速：1ml/min。
冰片的主要成分为龙脑、异龙脑。为了使两者色谱峰达到基线分离，定量分析准确，故在系统适用性试验中规定理论板数不得低于40000。此条件下样品可得到较好的分离。
2.2 测定方法 校正因子测定：取水杨酸甲酯适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每1ml含1.5mg的溶液，作为内标溶液；另取龙脑对照品10mg，精密称定，置10ml量瓶中，加内标溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，吸取1μl，注入气相色谱仪，计算校正因子。
测定法:取装量差异项下的样品80mg，精密称定，置具塞试管中，精密加入内标溶液10ml，密塞，充分振摇，静置。吸取上清液1μl，注入气相色谱仪，测定，即得。
2.3 阴性对照试验 取缺冰片药材的阴性样品溶液，按含量测定方法试验。测定结果，在与龙脑峰相应的保留时间附近无干扰峰检出。
2.4 线性分析 标准曲线的制备：精密称取水杨酸甲酯150.03mg，置100ml容量瓶中，加醋酸乙酯溶解并稀释至刻度，作为内标溶液。另精密称取龙脑对照品50.14mg置5ml容量瓶中，加内标溶液溶解并稀释至刻度，作为贮备液。精密量取贮备液0.1、0.3、0.6、1.0、1.2ml分别置10ml容量瓶中，加内标溶液至刻度，测定。结果见表1。
回归方程：Y=0.9754X-0.0007727, r=0.99987(n=5)。表1 线性关系测定结果 试验结果表明，龙脑在 1.2～0.1μg范围内，具有良好的线性关系。方程的斜率是截距的1262倍，直线基本通过原点，故样品含量测定采用一点法。
2.5 精密度试验 取同一对照品溶液(对照品浓度1.003mg/ml，内标浓度1.500mg/ml)连续进样5次，测得峰面积，计算，结果见表2。表2 精密度试验结果注：结果表明精密度良好
2.6 重现性试验 取同一批号的样品5份，精密称定，按含量测定方法测定其含量。结果见表3。表3 重现性试验结果注：结果表明该方法重现性较好
2.7 稳定性试验 取同一样品，按含量测定方法分别在0、1、2、4、8、12、24h测定。结果见表4。 表4 稳定性试验注：结果表明，样品在24h内稳定
2.8 加样回收率试验 分别精密量取对照品贮备液(10.028mg/ml)2ml，加入已知含量的样品(47.8mg/粒)中，按含量测定方法制备及测定，结果见表5。
2.9 样品含量测定 取样品10批，进行含量测定，结果见表6。表5 加样回收率试验结果注：样品的平均回收率为99.2%(n=5)，表明本法准确度较好 表6 样品含量测定结果
3 讨论
通过查阅文献［1］ 和参考《中国药典》［2］， 曾选择填充柱 (PEG-20M 涂布浓度为10%， 2mm×3m) 进行试验， 结果样品的保留时间较长， 约40min左右。 后又选择了弹性石英毛细管柱进行试验， 结果样品的保留时间大大缩短， 约5min左右， 提高了工作效率， 故选用弹性石英毛细管柱。
