地沟油(泔脚油),即从吃剩的饭菜中提炼出来的油。据有关部门测算,某市各类饭店每月产生的地沟油不下3000吨。地沟油危害很大,据科学试验测定,地沟油的酸败、羰基价远远超出国家规定的食用油卫生指标。酸败油脂对机体的细胞色素酶等几种酶系统产生损害作用,油脂的高度氧化产生黄曲霉素毒素,能引发多种癌症,动物长期摄入酸败变质的油脂,会出现体重减轻和发育障碍。地沟油中剧毒的黄曲霉毒素,毒性是砒霜的100倍,是目前发现的最强的化学致癌物质。实验证明,长期低剂量使用黄曲霉素可以使动物100%患上肝癌,而且,在其他部位也可以发生癌症,如胃腺癌、肾癌、直肠癌及乳腺、卵巢、小肠等部位癌肿。
黄曲霉毒素(AFT)是一组化学结构类似的化合物,目前已分离鉴定出12种,包括B1,B2,G1,G2,M1,M2,P1,Q,H1,GM,B2a和毒醇.黄曲霉毒素的的基本结构为二呋喃环和香豆素,B1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物.即含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮(香豆素).前者为基本毒性结构,后者与致癌有关.M1是黄曲霉毒素B1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物.主要分子型式含B1,B2,G1,G2,M1,M2等.其中M1和M2主要存在于牛奶中.B1为毒性及致癌性最强的物质.一类化学结构类似的化合物,均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉(aspergillusflavus)寄生曲霉(a.parasiticus)产生的次生代谢产物,在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。
二、应对方案
对黄曲霉毒素b1的限量,在之前的相关食品卫生标准中有明确规定,其中:玉米、花生仁、花生油中不得超过20ug/kg;大米和其他使用油类不得超过10ug/kg;其他粮食、豆类、发酵食品不得超过5ug/kg;婴儿代乳食品不得检出黄曲霉毒素b1。
针对地沟油中超标的黄曲霉毒素b1的检测,结合相关的检测标准,用高效液相色谱仪器-带荧光检测器可以对其进行检测,以确保人民用食用油的质量安全。
LC310高效液相色谱仪器配置:
P310高压输液泵:2台
高压静态混合器(1.7ml):1台
7725i手动进样阀:1套
柱后衍生装置:1套
荧光检测器:1台
二元梯度启动工具包:1套
CT310色谱柱温箱:1台
LC310色谱数据处理系统:1套
色谱柱:KromasilC18250*4.6mm,5um,100A或性能相当者:1根
溶剂托盘:1台
实验用前处理设备:
恒温水浴锅:1台
溶剂过滤器(带真空泵)1000ml:1台
高速匀质器(18000r/min—22000r/min):1台
黄曲霉毒素免疫亲和柱:1支
玻璃纤维滤纸:若干
玻璃注射器:规格10ml,20ml:若干
玻璃试管:直径12mm,长75mm,无荧光特性:2支
空气压力泵:1台
超声波清洗机:1台
实验用试剂:
乙腈:色谱纯
甲醇:色谱纯
苯:色谱纯
氯化钠:分析纯
水:超纯水或二次蒸馏水
磷酸氢二钠:分析纯
磷酸二氢钾:分析纯
氯化钾:分析纯
吐温-20:分析纯
碘:分析纯
样品提取:
参考标准:GB/T18979-2003
样品经过甲醇-水提取,提取液经过滤、稀释后,滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析柱净化,用水或吐温-20/PBS将免疫亲和柱上杂质除去,以甲醇通过免疫亲和层析柱洗脱,洗脱液通过带荧光检测器的高效液相色谱仪柱后碘溶液衍生测定黄曲霉毒素b1的含量。
色谱条件:
流动相:甲醇:水=45:55
流速:0.8ml/min
柱后衍生化系统
衍生溶液:0.05%碘溶液
衍生溶液流速:0.2ml/min
反应管温度:70℃
反应时间:1min
分析人员要求:
化学分析仪器及其相关专业或有高效液相色谱仪操作经验的人员。